Study of resveratrol against bone loss by using in-silico and in-vitro methods / Estudo do resveratrol contra a perda óssea usando métodos in silico e in vitro

By applying the in-silico method, resveratrol was docked on those proteins which are responsible for bone loss. The Molecular docking data between the resveratrol and Receptor activator of nuclear factor-kappa-Β ligand [RANKL] receptors proved that resveratrol binds tightly to the receptors, showed the highest binding affinities of −6.9, −7.6, −7.1, −6.9, −6.7, and −7.1 kcal/mol. According to in-vitro data, Resveratrol reduced the osteoclasts after treating Marrow-Derived Macrophages [BMM] with Macrophage colony-stimulating factor [MCSF] 20ng / ml and RANKL 50ng / ml, with different concentrations of resveratrol (2.5, 10 μg / ml) For 7 days, the cells were treated with MCSF (20 ng / ml) and RANKL (40 ng / ml) together with concentrated trimethyl ether and resveratrol (2.5, 10 μg / ml) within 12 hours. Which, not affect cell survival. After fixing osteoclast cells with formaldehyde fixative on glass coverslip followed by incubation with 0.1% Triton X-100 in PBS for 5 min and after that stain with rhodamine phalloidin staining for actin and Hoechst for nuclei. Fluorescence microscopy was performed to see the distribution of filaments actin [F.actin]. Finally, resveratrol reduced the actin ring formation. Resveratrol is the best bioactive compound for drug preparation against bone loss.

Com a aplicação do método in-silico, o resveratrol foi ancorado nas proteínas responsáveis pela perda óssea. Os dados de docking molecular entre o resveratrol e o ligante do receptor ativador do fator nuclear kappa-Β [Receptor Activator of Nuclear Factor kappa-B Ligant (RANKL)] provaram que o resveratrol se liga fortemente aos receptores, mostraram as afinidades de ligação mais altas de −6,9, −7,6, −7,1, −6,9, - 6,7 e -7,1 kcal / mol. De acordo com dados in-vitro, o resveratrol reduziu os osteoclastos após o tratamento de macrófagos derivados da medula óssea [Bone Marrow derived Macrophage (BMM)] com fator estimulador de colônias de macrófagos [Macrophage Colony-Stimulating Factor (MCSF)] 20ng / ml e RANKL 50ng / ml, com diferentes concentrações de resveratrol (2,5, 10 μg / ml). Durante sete dias, as células foram tratadas com MCSF (20 ng / ml) e RANKL (40 ng / ml) juntamente com éter trimetílico concentrado e resveratrol (2,5, 10 μg / ml) em 12 horas, processo que não afeta a sobrevivência celular. Após a fixação de células de osteoclastos com fixador de formaldeído em lamela de vidro seguido de incubação com 0,1% Triton X-100 em PBS por 5 min, foi realizado posteriormente o procedimento para corar com rodamina faloidina a actina e Hoechst os núcleos. A microscopia de fluorescência foi realizada para ver a distribuição dos filamentos de actina [F.actina]. Finalmente, o resveratrol reduziu a formação do anel de actina. O resveratrol é o melhor composto bioativo para o preparo de medicamentos contra a perda óssea.

Study of resveratrol against bone loss by using in-silico and in-vitro methods

Abstract By applying the in-silico method, resveratrol was docked on those proteins which are responsible for bone loss. The Molecular docking data between the resveratrol and Receptor activator of nuclear factor-kappa- ligand [RANKL] receptors proved that resveratrol binds tightly to the receptors, showed the highest binding affinities of 6.9, 7.6, 7.1, 6.9, 6.7, and 7.1 kcal/mol. According to in-vitro data, Resveratrol reduced the osteoclasts after treating Marrow-Derived Macrophages [BMM] with Macrophage colony-stimulating factor [MCSF] 20ng / ml and RANKL 50ng / ml, with different concentrations of resveratrol (2.5, 10 g / ml) For 7 days, the cells were treated with MCSF (20 ng / ml) and RANKL (40 ng / ml) together with concentrated trimethyl ether and resveratrol (2.5, 10 g / ml) within 12 hours. Which, not affect cell survival. After fixing osteoclast cells with formaldehyde fixative on glass coverslip followed by incubation with 0.1% Triton X-100 in PBS for 5 min and after that stain with rhodamine phalloidin staining for actin and Hoechst for nuclei. Fluorescence microscopy was performed to see the distribution of filaments actin [F.actin]. Finally, resveratrol reduced the actin ring formation. Resveratrol is the best bioactive compound for drug preparation against bone loss.

Resumo Com a aplicação do método in-silico, o resveratrol foi ancorado nas proteínas responsáveis pela perda óssea. Os dados de docking molecular entre o resveratrol e o ligante do receptor ativador do fator nuclear kappa- [Receptor Activator of Nuclear Factor kappa-B Ligant (RANKL)] provaram que o resveratrol se liga fortemente aos receptores, mostraram as afinidades de ligação mais altas de 6,9, 7,6, 7,1, 6,9, - 6,7 e -7,1 kcal / mol. De acordo com dados in-vitro, o resveratrol reduziu os osteoclastos após o tratamento de macrófagos derivados da medula óssea [Bone Marrow-derived Macrophage (BMM)] com fator estimulador de colônias de macrófagos [Macrophage Colony-Stimulating Factor (MCSF)] 20ng / ml e RANKL 50ng / ml, com diferentes concentrações de resveratrol (2,5, 10 g / ml). Durante sete dias, as células foram tratadas com MCSF (20 ng / ml) e RANKL (40 ng / ml) juntamente com éter trimetílico concentrado e resveratrol (2,5, 10 g / ml) em 12 horas, processo que não afeta a sobrevivência celular. Após a fixação de células de osteoclastos com fixador de formaldeído em lamela de vidro seguido de incubação com 0,1% Triton X-100 em PBS por 5 min, foi realizado posteriormente o procedimento para corar com rodamina faloidina a actina e Hoechst os núcleos. A microscopia de fluorescência foi realizada para ver a distribuição dos filamentos de actina [F.actina]. Finalmente, o resveratrol reduziu a formação do anel de actina. O resveratrol é o melhor composto bioativo para o preparo de medicamentos contra a perda óssea.

Study of resveratrol against bone loss by using in-silico and in-vitro methods / Estudo do resveratrol contra a perda óssea usando métodos in silico e in vitro

Abstract By applying the in-silico method, resveratrol was docked on those proteins which are responsible for bone loss. The Molecular docking data between the resveratrol and Receptor activator of nuclear factor-kappa-Β ligand [RANKL] receptors proved that resveratrol binds tightly to the receptors, showed the highest binding affinities of −6.9, −7.6, −7.1, −6.9, −6.7, and −7.1 kcal/mol. According to in-vitro data, Resveratrol reduced the osteoclasts after treating Marrow-Derived Macrophages [BMM] with Macrophage colony-stimulating factor [MCSF] 20ng / ml and RANKL 50ng / ml, with different concentrations of resveratrol (2.5, 10 μg / ml) For 7 days, the cells were treated with MCSF (20 ng / ml) and RANKL (40 ng / ml) together with concentrated trimethyl ether and resveratrol (2.5, 10 μg / ml) within 12 hours. Which, not affect cell survival. After fixing osteoclast cells with formaldehyde fixative on glass coverslip followed by incubation with 0.1% Triton X-100 in PBS for 5 min and after that stain with rhodamine phalloidin staining for actin and Hoechst for nuclei. Fluorescence microscopy was performed to see the distribution of filaments actin [F.actin]. Finally, resveratrol reduced the actin ring formation. Resveratrol is the best bioactive compound for drug preparation against bone loss.

Resumo Com a aplicação do método in-silico, o resveratrol foi ancorado nas proteínas responsáveis ​​pela perda óssea. Os dados de docking molecular entre o resveratrol e o ligante do receptor ativador do fator nuclear kappa-Β [Receptor Activator of Nuclear Factor kappa-B Ligant (RANKL)] provaram que o resveratrol se liga fortemente aos receptores, mostraram as afinidades de ligação mais altas de −6,9, −7,6, −7,1, −6,9, - 6,7 e -7,1 kcal / mol. De acordo com dados in-vitro, o resveratrol reduziu os osteoclastos após o tratamento de macrófagos derivados da medula óssea [Bone Marrow-derived Macrophage (BMM)] com fator estimulador de colônias de macrófagos [Macrophage Colony-Stimulating Factor (MCSF)] 20ng / ml e RANKL 50ng / ml, com diferentes concentrações de resveratrol (2,5, 10 μg / ml). Durante sete dias, as células foram tratadas com MCSF (20 ng / ml) e RANKL (40 ng / ml) juntamente com éter trimetílico concentrado e resveratrol (2,5, 10 μg / ml) em 12 horas, processo que não afeta a sobrevivência celular. Após a fixação de células de osteoclastos com fixador de formaldeído em lamela de vidro seguido de incubação com 0,1% Triton X-100 em PBS por 5 min, foi realizado posteriormente o procedimento para corar com rodamina faloidina a actina e Hoechst os núcleos. A microscopia de fluorescência foi realizada para ver a distribuição dos filamentos de actina [F.actina]. Finalmente, o resveratrol reduziu a formação do anel de actina. O resveratrol é o melhor composto bioativo para o preparo de medicamentos contra a perda óssea.

Catalysis at gold-ligand interfaces: a frustrated Lewis pair mechanism for selective reduction reaction / Catalise na interface ouro-ligante: pares de Lewis frustrados aplicados em reações de redução seletivas

The interaction of the organic ligands with metal nanoparticle has a very important role for applications in catalysis, as well as other processes involving ligands that can activate or poison the surface of metal nanoparticles. Very little has been studied so far on the role of organic ligands used either in the preparation of nanoparticles for applications in catalysis or addition in the reaction to activate the catalyst. In this thesis, we have studied strategies for the synthesis of metal nanoparticles, their use as components for the preparation of supported catalysts and activation and deactivation processes involving the ligands used as stabilizers or purposely added to the reaction medium or support for stimulate new reactivity and selectivity in reactions of industrial interest, such as hydrogenation. Here, the concept of frustrated Lewis pairs (FLPs) has been expanded to surface-FLP analogous formed by combining gold nanoparticles (NPs) and Lewis bases, such as amines or phosphines, creating a new channel for the heterolytic cleavage of H2, and thereby performing selective hydrogenation reactions with gold. A first approach to improve the catalytic activity of gold nanoparticles was to analyze the effect of nitrogen-containing bases. The starting inactive gold nanoparticles became highly active for the selective hydrogenation of alkyne into cis-alkenes. The hydrogenation proceeded smoothly and fully selective using H2 as the hydrogen source and under relatively mild conditions (80 °C, 6 bar H2). Our studies also have revealed that the presence of capping ligands blocks the adsorption of the amine to the gold surface, avoiding the FLPs interface and thereby leading to low catalytic activity. When the capping ligands were removed from the catalyst surface and an amine ligand was added, the FLPs interface is recovered and an enhanced catalytic activity was observed. Furthermore, we have demonstrated the successful use of simple organophosphorus ligands to boost the catalytic activity of Au NPs for a range of important reduction reactions, namely, epoxides, N-oxides, sulfoxides, and alkynes. Furthermore, the choice of phosphorus-containing ligands resulted in a decrease in the amount necessary to reach high conversion and selectivity in comparison with our previous study with N-containing ligands. The ligand-to-metal ratio decreased from 100 (amine/Au) to 1 (phosphite/Au). The synthesis of gold nanoparticles supported on N-doped carbon supports was used as an alternative method for the synthesis of a heterogeneous active gold catalyst for selective hydrogenations. The main advantage with respect to previous studies was to avoid the addition of external ligands, in large excess, for the activation of gold surfaces via FLP, making the whole process environmentally and economically attractive

A interação dos ligantes orgânicos com nanopartículas de metal certamente tem um papel muito importante para aplicações em catálise, bem como outros processos envolvendo ligantes que podem ativar ou envenenar a superfície de nanopartículas metálicas. Até agora, muito pouco foi estudado sobre o papel dos ligantes orgânicos utilizados na preparação de nanopartículas para aplicações em catálise ou adição na reação para ativar o catalisador. Nesta tese, foram estudadas estratégias para a síntese de nanopartículas metálicas, seu uso como componentes para a preparação de catalisadores suportados e processos de ativação e desativação envolvendo ligantes empregados como estabilizantes ou propositalmente adicionados ao meio de reação ou suporte para estimular novas reatividades e seletividade em reações de interesse industrial, como reações de hidrogenação. Aqui, o conceito de pares de Lewis frustrados (FLPs) foi expandido para o seu análogo de superfície formado pela combinação de nanopartículas (NPs) de ouro e bases de Lewis, como aminas ou fosfinas, criando um novo canal para a clivagem heterolítica de H2 e, assim, realizando reações seletivas de hidrogenação com ouro. Uma primeira abordagem para melhorar a atividade catalítica das nanopartículas de ouro foi analisar o efeito de bases contendo nitrogênio. As nanopartículas de ouro inicialmente inativas tornaram-se altamente ativas para a hidrogenação seletiva de alquino em cis-alquenos. A hidrogenação prosseguiu foi factível e totalmente seletiva usando H2 como fonte de hidrogênio e sob condições relativamente amenas (80 °C, 6 bar de H2). Nossos estudos também revelaram que a presença de estabilizantes pode bloquear a adsorção da base na superfície do ouro, impedindo a formação da interface FLPs e, portanto, levando a baixa atividade catalítica. Quando os estabilizantes foram removidos da superfície do catalisador e um ligante foi adicionado, o FLPs é formado sendo a atividade catalítica aprimorada. Além disso, demonstramos o uso bem-sucedido de ligantes organofosforados atuando como ativadores de Au NPs em uma série de importantes reações de redução, como, epóxidos, N-óxidos, sulfóxidos e alquinos. Além disso, a escolha do ligante fosforado resultou em uma diminuição na quantidade necessária para alcançar alta conversão mantendo a seletividade inalterada. A relação ligante/metal diminuiu de 100/1 (amina/Au) para 1/1 (fosfito/Au). A síntese de nanopartículas de ouro suportadas em carbono dopado com nitrogênio foi utilizada como método alternativo para a síntese de um catalisador heterogêneo de ouro ativo para hidrogenações seletivas. A principal vantagem em relação aos estudos anteriores foi evitar a adição de ligantes externos, em grande excesso, para a ativação de superfícies de ouro via FLP, tornando todo o processo ambiental e economicamente atraente

Planejamento, síntese, modelagem molecular e avaliação biológica de novos potenciais inibidores duais HDAC/ MMP não-hidroxamatos / Design, synthesis, molecular modeling and biological evaluation of novel potential non-hydroxamate dual HDAC/ MMP inhibitors

A inibição de alvos específicos como metaloproteinase de matriz (MMP) e histona desacetilase (HDAC) é amplamente estudada para impedir o progresso do câncer. Foi estabelecido que a inibição concomitante de MMP e HDAC é eficaz no combate de tumores sólidos e hematológicos. Ambos os alvos possuem um íon Zn2+ em seu sítio ativo, fundamental para a atividade destas enzimas. A alta afinidade dos inibidores conhecidos de MMP e de HDAC é conferida, principalmente, por um potente grupo ligante de zinco (ZBG). O ácido hidroxâmico é o ZBG mais potente conhecido atualmente, entretanto, este apresenta instabilidade farmacocinética, levando a ineficácia e genotoxicidade em testes clínicos. Frente a este contexto, o presente trabalho teve como objetivo o planejamento, síntese, modelagem molecular e avaliação biológica de novos inibidores duais MMP/HDAC não-hidroxamatos. Os compostos foram planejados utilizando estratégias de hibridação molecular, a partir de arcabouços provenientes inibidores de HDAC e MMP, gerando compostos arilsulfonamídicos com variações no tipo de ZBG inserido e na sua respectiva posição relativa na estrutura geral. Foram sintetizados sete análogos, em duas a três etapas reacionais, utilizando métodos de sulfonilação e acoplamento com agentes condensantes, partindo dos ésteres para e meta aminobenzoicos. Os rendimentos globais variaram de 25% a 55% e os produtos obtidos foram caracterizados por RMN 1H e 13C, LC/MS, CLAE e ponto de fusão. Os compostos tiveram sua atividade citotóxica avaliada em células HOG (oligodendroma) e T98G (glioblastoma), dentre os quais o 6a, que possui o ZBG 2-amino anilida, foi o mais promissor, apresentando atividade nas duas linhagens na casa de nM. Ensaios de coordenação com Fe2+ comprovaram a capacidade quelante dos análogos contendo ácido hidroxâmico e dos demais compostos citotóxicos, 4a e 4b (ZBG-2, salicilal-hidrazona), o que não foi observado para o composto 6a. Os estudos de ancoramento molecular permitiram sugerir um modo de interação para todos os ZBG propostos frente aos respectivos alvos (HDAC e MMP), sendo observado que o ZBG 4 (2-amino anilida) faria a interação de modo monodentado com a HDAC, enquanto não seria possível o encaixe no sítio catalítico da MMP. Conclui-se, portanto, que o planejamento proposto permitiu a obtenção de compostos promissores como antitumorais, e que a substituição do ácido hidroxâmico por outros ZBG fornece moléculas ativas frente a células tumorais. Entretanto, a avaliação biológica frente à MMP e HDAC é necessária para confirmar o mecanismo de ação proposto

Inhibition of specific targets such as matrix metalloproteinase (MMP) and histone deacetylase (HDAC) is extensively studied regarding arrest cancer growth. Particularly, concomitant inhibition of MMP and HDAC is effective against solid and hematologic tumors. Both targets have an ion Zn2+ at their catalytic site, which is essential for respective enzymatic activity. High affinity of known MMP and HDAC inhibitors is mainly provided by a potent zinc binding group (ZBG). Hydroxamic acid is the most potent ZBG currently known; however, it presents low pharmacokinetics stability, which results in its ineffectiveness and genotoxicity along clinical trial. So, the aim of this work comprised the design, synthesis, molecular modeling and biological evaluation of novel potential non-hydroxamate dual HDAC/ MMP inhibitors. Compounds were designed by molecular hybridation, employing scaffolds from HDAC and MMP inhibitors, which provided arylsulfonamides with variation about the ZBG type and its respective relative position in the general structure. Seven compounds were synthesized, in two to three reaction steps, through methods that comprise sulfonilation and coupling with condensing agents, using para and meta-aminobenzoic esters as starting material. Compounds showed global yields around 25-55 % and were characterized by 1H and 13C NMR, LC/MS, HPLC and melting point. Compounds were evaluated about their cytotoxicity against HOG (oligodendroma) and T98G (glioblastoma) cells, which 6a, with ZBG 2-aminobenzamide, was the most promising molecules, presenting activity against both cell lines at nM range. Coordination assays with Fe2+ proved the chelating capacity of hydroxamate analogues as well as the cytotoxic compounds, 4a and 4b (ZBG-2, salicylal-hydrazone), which was not observed about 6a. Molecular docking allowed to suggest an interaction model for all proposed ZBG with the respective targets (MMP and HDAC), showing that (ZBG-4) 2-aminobenzamide interacts with HDAC by monodentate way, but does not docks at MMP catalytic site. We conclude that the proposed design allowed obtaining promising compounds as antitumors agents, and the replacement of hydroxamic acid by other ZBG provide active molecules against tumor cells. However, biological evaluation against MMP and HDAC is necessary to confirm the proposed action mechanism

Mannose-binding lectin gene polymorphism and its effect on short term outcomes in preterm infants / Polimorfismo do gene da lectina ligante de manose e seu efeito em desfechos de curto prazo em bebês prematuros

Abstract Objective: Mannose-binding lectin, which belongs to the collectin family, is an acute-phase reactant that activates the complement system. This study aimed to investigate the effect of MBL2 gene polymorphism on short-term outcomes in preterm infants. Method: Infants of <37 gestational weeks who were admitted to the neonatal intensive care unit during a two-year period were enrolled in this prospective study. The neonates were categorized into two groups according to their MBL2 genotypes. Normal MBL2 genotype was defined as MBL2 wild-type (AA genotype), whereas mutant MBL2 genotype was defined as MBL2 variant-type (AO/OO genotype). The relationship between MBL2 genotype and short-term morbidity and mortality was evaluated. Results: During the two-year study period, 116 preterm infants were enrolled in this study. In MBL2 variant-type, mannose-binding lectin levels were significantly lower and incidences of mannose-binding lectin deficiency (MBL level < 700 ng/mL) were higher (p < 0.001). In this group, the prevalence of respiratory distress syndrome and mortality was significantly higher (p < 0.001, p = 0.03 respectively). In the MBL2 wild-type group, the prevalence of necrotizing enterocolitis (NEC) was higher (p = 0.01). Logistic regression analyses revealed that MBL2 variant-type had a significant effect on respiratory distress syndrome development (odds ratio, 5.1; 95% confidence interval, 2.2-11.9; p < 0.001). Conclusions: MBL2 variant-type and mannose-binding lectin deficiency are important risk factors for respiratory distress syndrome development in preterm infants. Additionally, there is an association between MBL2 wild-type and NEC. Further studies on this subject are needed.

Resumo Objetivo: A lectina ligante de manose (MBL, do inglês mannose-binding lectin), que pertence à família das colectinas, é um reagente de fase aguda que ativa o sistema complemento. Este estudo teve como objetivo investigar o efeito do polimorfismo do gene MBL2 em desfechos de curto prazo em prematuros. Método: Este estudo prospectivo incluiu crianças com menos de 37 semanas de gestação admitidas na unidade de terapia intensiva neonatal durante dois anos. Os neonatos foram categorizados em dois grupos de acordo com os genótipos do MBL2. O genótipo normal do gene MBL2 foi definido como MBL2 do tipo selvagem (genótipo AA), enquanto o genótipo mutante do gene MBL2 foi definido como o gene variante (genótipo AO/OO). Foi avaliada a relação entre o genótipo MBL2 e a morbidade e mortalidade em curto prazo. Resultados: Durante o período de dois anos, 116 bebês prematuros foram incluídos neste estudo. Os níveis de lectina ligante de manose foram significativamente menores nos variantes do MBL2 e as incidências de deficiência de lectina ligante de manose (nível de MBL < 700 ng/mL) foram maiores (p < 0,001). Nesse grupo, a prevalência de síndrome do desconforto respiratório (SDR) e a mortalidade foram significativamente maiores (p < 0,001, p = 0,03, respectivamente). No grupo MBL2 do tipo selvagem, a prevalência de enterocolite necrosante foi maior (p = 0,01). Análises de regressão logística revelaram que os genes variantes do MBL2 apresentaram um efeito significativo no desenvolvimento da síndrome do desconforto respiratório (odds ratio, 5,1; intervalo de confiança de 95%, 2,2-11,9; p < 0,001). Conclusões: As variantes do MBL2 e a deficiência de lectina ligante de manose são importantes fatores de risco para o desenvolvimento da síndrome do desconforto respiratório em neonatos prematuros. Além disso, existe uma associação entre MBL2 do tipo selvagem e a enterocolite necrosante. Mais estudos são necessários sobre esse assunto.

Network prediction of the potential molecular mechanisms in birds of prey exposed to organochlorine pesticides / Red de predicción de potenciales mecanismos moleculares en aves de presa expuestas a pesticidas organoclorados

Abstract In the 1960s, organochlorine compounds were responsible for the decline of birds of prey populations such as Haliaee- tus leucocephalus and Falco peregrinus. Pesticides similar to DDT cause bioaccumulation in birds, affecting their eggshell com- position and compromising their development. Using system biology tools, the goal of this study was to better comprehend how organochlorines act on birds. We performed a literature review, using the STITCH 5.0 platform, searching for the terms DDT and TCDD. The sub-networks were amplified in 100 interactions in STRING 10.5 and joined by the Cytoscape 3.4.0 Merge software, using the experimental animal model Gallus gallus. Clusterization, gene ontology, and centrality were the parameters evaluated in the resulting network. The resulting network had 1,417 interactions and 137 nodes. The clusterization indicated four clusters and the gene ontology pointed to biological processes related to cell signaling and morphological development. The centrality analysis indicated ESR1 and HSP90AB1 as hub/bottleneck proteins involved in the estrogen pathway and calcium transport. Therefore, it is possible that HSP90 proteins have increased expression in birds contaminated with organochlorine pesticides, favoring ESRI-organochlorines interaction and disturbing the calcium availability related to the eggshell formation. The presence or absence of heat shock proteins, such as HSP90, influences several aspects of reproduction in many species. Therefore, the relationship between the HSP90 protein expression and thin-shell syndrome was identified for the first time in this in silico study.

Resumen En los años 60, los organoclorados fueron responsables del declive de aves de rapiña como Haliaeetus leucocephalus y Falco peregrinus. Pesticidas como el DDT, causan biomagnificación en las aves, afectando las cáscaras de los huevos y dañando su desarrollo. El objetivo de este trabajo fue, a través de herramientas de biología de sistemas, comprender cómo los organoclorados actúan en el organismo de las aves. A través de una revisión bibliográfica se incluyeron dos compuestos, DDT y TCDD. Estos fue ron prospectos en la plataforma STITCH 5.0. Las subredes encontradas fueron aumentadas en 100 interacciones en la plataforma STRING 10.5 y unidas por la herramienta Merge del programa Cytoscape 3.4.0, usando el modelo experimental Gallus gallus. En la red resultante se analizaron la clusterización, la ontología génica y la centralidad. La red resultante presentó 137 nudos y 1.417 interacciones. El análisis de clusterización indicó 4 clusters, siendo que el análisis y ontología génica apuntó procesos biológicos ligados a la señalización y al desarrollo morfológico. El estudio de centralidad apuntó a ESR1 y HSP90AB1 como los hubs-bottle- neck proteínas que estaban involucradas en la vía de recepción de estrógeno y en el transporte de calcio. De acuerdo con los resultados podemos inferir que las proteínas HSP90 tienen su expresión aumentada, en aves contaminadas con pesticidas organoclo rados, favoreciendo la interacción entre ESRI y DDT / TCDD. Con ello, la interacción ESRI y la hormona estrógeno se compromete perjudicando el transporte de calcio y consecuentemente la formación de la cáscara del huevo en aves expuestas. La expresión de proteínas de choque térmico ha sido asociada a varios aspectos de la reproducción en muchas especies, sin embargo, una asociación entre HSP90 y el síndrome de la cáscara fina del huevo fue identificada por primera vez en este experimento in silico.

Linfoma anaplásico de células grandes associado a implante mamários: um desafio diagnóstico / Breast implant-associated anaplastic large cell lymphoma: a diagnostic challenge

O linfoma anaplásico de células grandes associado a implante mamário (BIA-ALCL ) é uma entidade provisória com características morfológicas e imunofenotípicas indistinguíveis do linfoma anaplásico de células grandes (ALCL) ALK negativo. Ao contrário do ALCL, o BIA-ALCL surge principalmente em associação ao implante mamário. A confirmação diagnóstica do BIA-ALCL pode ser difícil e a associação de características morfológicas e patológicas com citometria de fluxo e imuno-histoquímica pode auxiliar no diagnóstico. O objetivo deste relatório é descrever um caso de BIA-ALCL no qual a análise citológica e imunofenotipológica utilizando citometria de fluxo sugeriu a presença de grandes células positivas para CD30 no líquido de derrame.

Breast implant-associated anaplastic large cell lymphoma (BIA-ALCL) is a provisional entity with morphological and immunophenotypic characteristics indistinguishable from ALKnegative anaplastic large cell lymphoma (ALCL). Unlike ALCL, BIA-ALCL arises mainly in association with breast implantation. Diagnostic confirmation of BIA-ALCL can be difficult and associating morphological and pathological hallmarks with flow cytometry and immunohistochemistry can assist in the diagnosis. The objective of this report is to describe a case of BIA-ALCL in which cytological and immunophenotypological analysis using flow cytometry suggested the presence of large CD30-positive cells in the effusion fluid.

Mannose-binding lectin gene polymorphism and its effect on short term outcomes in preterm infants.

OBJECTIVE: Mannose-binding lectin, which belongs to the collectin family, is an acute-phase reactant that activates the complement system. This study aimed to investigate the effect of MBL2 gene polymorphism on short-term outcomes in preterm infants. METHOD: Infants of <37 gestational weeks who were admitted to the neonatal intensive care unit during a two-year period were enrolled in this prospective study. The neonates were categorized into two groups according to their MBL2 genotypes. Normal MBL2 genotype was defined as MBL2 wild-type (AA genotype), whereas mutant MBL2 genotype was defined as MBL2 variant-type (AO/OO genotype). The relationship between MBL2 genotype and short-term morbidity and mortality was evaluated. RESULTS: During the two-year study period, 116 preterm infants were enrolled in this study. In MBL2 variant-type, mannose-binding lectin levels were significantly lower and incidences of mannose-binding lectin deficiency (MBL level<700ng/mL) were higher (p<0.001). In this group, the prevalence of respiratory distress syndrome and mortality was significantly higher (p<0.001, p=0.03 respectively). In the MBL2 wild-type group, the prevalence of necrotizing enterocolitis (NEC) was higher (p=0.01). Logistic regression analyses revealed that MBL2 variant-type had a significant effect on respiratory distress syndrome development (odds ratio, 5.1; 95% confidence interval, 2.2-11.9; p<0.001). CONCLUSIONS: MBL2 variant-type and mannose-binding lectin deficiency are important risk factors for respiratory distress syndrome development in preterm infants. Additionally, there is an association between MBL2 wild-type and NEC. Further studies on this subject are needed.

Association between P561T polymorphism in growth hormone receptor gene and mandibular prognathism: systematic review and metaanalysis

Objective: Through a systematic review and meta-analysis, the aim this study was evaluating the association between the P561T polymorphism in GHR (rs6184) with skeletal Class III malocclusion in different populations. Methods: A broad search for studies was conducted using the databases: PubMed, Web of Science, Scopus, Cochrane, Google Scholar and Open Grey until December 2018. The study design according to PECOS was: P-Orthodontic patients; E- polymorphism P561T in GHR; C- absence of polymorphism P561T in GHR; O- linear dimension alterations in maxilla and mandibular measurements; S- Cross-sectional studies. The selected studies were qualified by 10-point scoring sheet methodological quality. The subgroups evaluation was performd according to the linear measurements evaluated in two or more studies, as follows: body height, N-S, A'-PTM', Gn-Go, Pog'-Go, and Co-Go.A fixed effect model was used and the mean differences were performed using the inverse-variance meta-analysis. The I2 (95%) was used to measure statistical heterogeneity between studies, where I2 values of 25%, 50%, and 75% signified low, medium, and high heterogeneity, respectively. Results: The initial search identified 146 studies. After excluding duplicate abstracts, 138 were selected. Seven studies were included in the systematic review. Only one study was classified as having low methodological quality. Three studies were included in the meta-analysis. The meta-analysis demonstrated an association between the Co-Go linear measure and CC genotype (p<0.0001), with a mean difference and confidence interval of 3.79 [2.06, 5.52]. CC was associated with greater mandibular height. Conclusion: The polymorphism P561T in GHR is associated with Co-Go measurement in Asians, with low level of evidence.

Objetivo: Por meio de uma revisão sistemática e meta-análise, o objetivo deste estudo foi avaliar a associação entre o polimorfismo P561T em GHR (rs6184) com a maloclusão de Classe III esquelética em diferentes populações. Métodos: Uma ampla pesquisa de estudos foi realizada utilizando os bancos de dados PubMed, Web of Science, Scopus, Cochrane, Google Scholar e Open Grey até dezembro de 2018. O desenho do estudo de acordo com o PECOS foi: P-Pacientes ortodônticos; Polimorfismo P561T em GHR; Causência de polimorfismo P561T em GHR ; O-alterações na dimensão linear das medidas maxilares e mandibulares; S- Estudos transversais. Os estudos selecionados foram qualificados pela qualidade metodológica em uma escala de 10 pontos. A avaliação emsubgrupos. O subgrupo foi realizada de acordo com as medidas lineares avaliadas em dois ou mais estudos, como a seguir: altura corporal, N-S, A'-PTM ', Gn-Go, Pog'-Go. Foi utilizado o modelo de efeito fixo e as diferenças médias foram realizada usando a metanálise de variância inversa. O I2 (95%) foi utilizado para medir heterogeneidade estatística entre estudos, em que valores de I2 de 25%, 50% e 75% significaram baixa, média e alta heterogeneidade, respectivamente. Resultados: A pesquisa inicial identificou 146 estudos. Após excluir resumos duplicados, 138 foram selecionados. Sete estudos foram incluídos na revisão sistemática. Apenas 1 estudo foi classificado como de baixa qualidade metodológica. Três estudos foram incluídos na meta-análise. A metaanálise demonstrou uma associação entre a medida linear Co-Go e o genótipo CC (p<0,0001), com diferença média e intervalo de confiança de 3,79 [2,06; 5,52]. CC foi associado com maior altura mandibular. Conclusão: O polimorfismo P561T em GHR está associado à medida Co-Go em asiáticos, com baixo nível de evidência.

Campos electromagnéticos planares permiten explicar transducción en receptores de células T / Use of planar electromagnetic fields to explain transduction in T-cell receptors / Campos eletromagnéticos planares permitem explicar transdução em receptores de células T

El acople de un ligando con un receptor induce una señal que viaja a través de este último hasta llegar a su dominio intracelular, donde desencadena una cascada de respuesta. Analizando el acople del Receptor de Células T (TCR) con antígenos foráneos, los autores identificaron patrones moleculares de geometría planar al interior de este receptor, capaces de internalizar la señal producida por el acople TCR/Antígeno. Este mecanismo fue también hallado en diversidad de sistemas receptor-ligando de diferente funcionalidad biológica, tales como las parejas Bomba de Calcio-ADP, el acople viral gp120-CD4 y el sistema Hemoglobina-Oxígeno. Dicho mecanismo identificado por los autores es de naturaleza Cuántica y permitiría explicar la transducción de señales en todo tipo de receptores bioquímicos. Este hallazgo facilitaría el diseño de péptidos-vacuna con alta capacidad inmunogénica así como el desarrollo de nuevos medicamentos.

The coupling of a ligand with a receptor induces a signal that travels through the receptor until it reaches the intracellular domain, where it triggers a response cascade. By analyzing the coupling of receptor cells (TCR) with foreign antigens, the authors identified the presence of molecular patterns, planar in geometry, within this receptor, that are capable of internalizing the signal produced by TCR/antigen coupling. This mechanism, also found in a range of receptor-ligand systems with greatly differing biological functions, including calcium pump-ADP, gp120-CD4 viral coupling, and the hemoglobin-oxygen system, is quantum in nature and capable of explaining the means of signal transduction in all kinds of biochemical receptors. As such, the finding may facilitate the design of vaccine-peptides with high immunogenicity, as well as make it possible to develop new drugs.

O acoplamento de um ligante com um receptor induz um sinal que viaja através do receptor atingindo seu domínio intracelular onde desencadeia uma cascata de resposta. Analisando o acoplamento do Receptor de Células T (TCR) com antígenos forâneos, os autores identificaram padrões moleculares de geometria planar no interior desse receptor, capazes de internalizar o sinal produzido pelo acoplamento TCR/ Antígeno. Esse mecanismo também foi encontrado em múltiplos sistemas receptor-ligante de diferente funcionalidade biológica, tais como os pares Bomba de Cálcio-ADP, o acoplamento viral gp120-CD4 e o sistema de Hemoglobina-Oxigênio. Tal mecanismo identificado pelos autores é de natureza Quântica e permitiria explicar a transdução de sinais em todo tipo de receptores bioquímicos. Este achado também facilitaria o desenho de peptídeos-vacina com alta capacidade imunogênica bem como o desenvolvimento de novos medicamentos.

Elevated serum osteoprotegerin levels in women: friend or foe? / Níveis séricos elevados de osteoprotegerina na mulher: aliado ou inimigo?

SUMMARY Introduction: osteoprotegerin has emerged as a new candidate for the treatment of osteoporosis. However, high levels of osteoprotegerin have been linked to vascular calcification, an independent and well-defined risk factor for cardiovascular disease (CVD) and mortality. Thus, the action of osteoprotegerin in these situations has been questioned. Objective: to evaluate the effect of osteoprotegerin (OPG) on the human body, especially in bone tissue and in vascular diseases. Methods: the scientific databases consulted were PubMed-Medline and Cochrane, using keywords (MeSH terms) grouped into the following syntaxes: (Osteoprotegerin OR Osteoclastogenesis Inhibitory Factor OR Receptors, Tumor Necrosis Factor, Member 11b OR Tumor Necrosis Factor Receptor Superfamily, Member 11b OR FDCR-1 Protein OR FDCR 1 Protein OR OCIF Protein OR Follicular Dendritic Cell-Derived Receptor-1) AND (Bones AND Bone OR Bones AND Bone Tissue OR Bones OR Bone Tissue OR Cardiovascular Diseases). Results: Osteoprotegerin is present in various organs and binds to two ligands: nuclear factor kB (RANKL) related to the differentiation of osteoclasts, and tumor necrosis factor related to the apoptosis-inducing ligand (TRAIL). OPG inhibits the regulation effects of nuclear factor kB on inflammation and on the skeletal and vascular systems, preventing the apoptosis induced by TRAIL, being related to the preservation of bone tissue. Conclusion: a deeper knowledge of the mechanisms involved in the association between OPG serum levels, bone integrity and cardiovascular disease can provide important data for future therapeutic interventions.

RESUMO Introdução: a osteoprotegerina (OPG) tem surgido como uma nova candidata para o tratamento da osteoporose; no entanto, níveis elevados de OPG têm sido relacionados à calcificação vascular, um fator de risco independente e bem definido para doença cardiovascular (DCV) e mortalidade. Assim, a ação da OPG nessas situações tem sido questionada. Objetivo: avaliar a ação da OPG no corpo humano, em especial no tecido ósseo e nas doenças vasculares. Métodos: as bases de informação científica consultadas foram PubMed-Medline e Cochrane, utilizando-se palavras-chave (MeSH terms) agrupadas nas seguintes sintaxes: (Osteoprotegerin OR Osteoclastogenesis Inhibitory Factor OR Receptors, Tumor Necrosis Factor, Member 11b OR Tumor Necrosis Factor Receptor Superfamily, Member 11b OR FDCR-1 Protein OR FDCR 1 Protein OR OCIF Protein OR Follicular Dendritic Cell-Derived Receptor-1) AND (Bones AND Bone OR Bones AND Bone Tissue OR Bones OR Bone Tissue OR Cardiovascular Diseases). Resultados: a OPG está presente em vários órgãos e une-se a dois ligantes: o fator nuclear kB (RANKL), relacionado com a diferenciação dos osteoclastos, e o fator de necrose tumoral, relacionado ao ligante indutor de apoptose (TRAIL). Assim, a OPG inibe os efeitos da regulação do fator nuclear kB na inflamação e nos sistemas esquelético e vascular, prevenindo a apoptose induzida pelo TRAIL, estando relacionada com a preservação do tecido ósseo. Conclusão: um conhecimento mais aprofundado sobre os mecanismos envolvidos na associação entre os níveis séricos da OPG, integridade óssea e doenças cardiovasculares podem proporcionar dados importantes para futuras intervenções terapêuticas.

Polimorfismos genéticos e o insucessodos implantes dentários: estudo piloto / Genetic polymorphism and failure ofdental implants: a pilot study

Objetivo: verificar a relação entre polimorfismos genéticos ligados às citocinas da remodelação óssea osteoprotegerina (OPG) e o ligante do ativador do receptor do fator nuclear kappa ß(RANKL), além de relacionar a presença de polimorfismos em OPG e RANKL com o insucesso clínico dos implantes dentários ao longo do tempo e determinar quais combinações de polimorfismos de OPG e RANKL estão associados ao insucesso de implantes dentários. Métodos: vinte pacientes, de ambos os sexos, maiores de 18 anos, reabilitados com 34 implantes dentários, foram avaliados por um período de 24 meses após a instalação das coroas sobre implantes. Após os exames clínico e radiográfico, os pacientes foram incluídos no grupo de insucesso dos implantes caso um ou mais do seguintes critérios fossem encontrados: mobilidade, queixas subjetivas persistentes, infecção peri-implantar recorrente com supuração, radiolucência contínua ao redor do implan- te, profundidade de sondagem ≥ 5mm e sangramento à sondagem. Foi coletado sangue periférico para a análise do polimorfismo das citocinas OPG e RANKL por meio da reação em cadeia da polimerase (PCR). Resultados: não houve diferença estatisticamente significativa entre o grupo de falha dos implantes em relação aos genótipos de OPG e RANKL. Conclusão: os polimorfismos de OPG e RANKL não influenciaram no insucesso dos implantes dentários na amostra avaliada.

Objective: To investigate the relationship between genetic polymorphisms related to cytokinesin bone remodeling osteoprotegerin (OPG) and receptor activator of nuclear factor kappa ß ligand (RANKL). It also aims to relate the presence of OPG and RANKL polymorphisms with clinicalfailure of dental implants over time and to determine which combinations of OPG and RANKL polymorphisms are associated with failure of dental implants. Methods: Twenty patients of both sexes, over eighteen years, rehabilitated with thirty-four dental implants were evaluated during 24months after implant-supported crown placement. After clinical and radiographic examination, patients were included in a failure group if one or more of the following criteria were identified: mobility, persistent subjective complaints, recurrent peri-implantitis with suppuration, continuous radiolucency around the implant, probing depth ≥ 5 mm and bleeding on probing. Peripheral blood was collected for analysis of cytokine OPG and RANKL polymorphisms by polymerase chain reaction (PCR). Results: There were no statistically significant differences between the failure group in relation to genotypes OPG and RANKL. Conclusion: OPG and RANKL polymorphisms didnot influence dental implants failure in the investigated sample.

Análise imunoistoquímica após terapia fotodinâmica com cloro-alumínio ftalocianina em tecidos gengivais de humanos / Immunohistochemical analyzes after photodynamic therapy with chloro-aluminum phthalocyanine in human gingival tissues

Embora a terapia fotodinâmica venha sendo utilizada como uma ferramenta útil nos últimos 30 anos em oncologia, poucos estudos clínicos em odontologia têm sido conduzidos. A terapia fotodinâmica (TFD) utiliza fotossensibilizantes atóxicos e seletivos que são administrados nas células alvo seguida de aplicação local de luz visível, produzindo espécies reativas de oxigênio capazes de ocasionar morte celular por apoptose ou necrose, de afetar a vascularidade local, além de exercer importantes efeitos no sistema imune. Novas gerações de fármacos fotossensibilizantes, como as ftalocianinas nanoparticuladas tem apresentado excelentes resultados na atividade antitumoral e antibacteriana. Neste contexto, o presente trabalho realizou o primeiro protocolo clínico de aplicação local da nanoemulsão de cloroalumínio ftalocianina (AlClFc) seguida de irradiação em gengiva de humanos, e analisou descritiva e comparativamente, por meio de imunoistoquímica, a expressão de RANK, RANKL, OPG e VEGF em um modelo split-mouth. Oito voluntários saudáveis com indicação clínica de exodontia foram incluídos no estudo. Sete dias antes da exodontia, foi aplicado na gengiva dos participantes, 5µM de nanoemulsão de AlClFc seguida de irradiação com laser diodo (660nm, 7J/cm2), o lado contralateral foi utilizado como controle. Os espécimes teciduais foram removidos sete dias após a TFD e subdivididos em dois grupos (grupo teste e grupo controle) para análise histológica e imunoistoquímica. Os pacientes foram monitorados no dia aplicação, 7, 14 e 30 dias após a terapia para avaliação de efeitos adversos da terapia. Alterações vasculares foram observadas nas amostras gengivais que receberam a TFD. Áreas de edema e congestão vascular, além de intensa vascularização foram visualizadas. Adicionalmente, focos de calcificação distrófica em região subepitelial foram visualizados nos espécimes do grupo teste. Os resultados demonstraram um padrão similar dos escores de imunomarcação de RANK, RANKL e VEGF entre os grupos teste e controle, não havendo diferença estatística significante (p=0.317, p=0.777, p=0.814, respectivamente). RANK e RANKL exibiram imunomarcação fraca ou ausente na maioria dos espécimes analisados. Não houve imunomarcação para a OPG. O VEGF mostrou imunomarcação moderada a forte nos espécimes do grupo teste. Adicionalmente, o estudo clínico mostrou que a terapia foi bem tolerada por todos os pacientes. Os efeitos adversos foram de curta duração e totalmente reversíveis. Tomados em conjunto, os resultados apresentados neste estudo mostraram que o protocolo utilizado por nós, mediado por nanoemulsão contendo AlClFc, é seguro para aplicação clínica em tecido gengival e, sugerem uma forte imunomarcação para o VEGF após a terapia. (AU)

Although photodynamic therapy have been used as a useful tool over the past 30 years in oncology, few clinical trials have been conducted in dentistry. Photodynamic therapy (PDT) uses non-toxic photosensitizers and selective which are administered in target cells followed by local application of visible light, producing reactive oxygen species capable of causing cell death by apoptosis or necrosis, injured the local vasculature, and exert important effects on the immune system. New generations of photosensitizing agents, such as nanoparticulate phthalocyanines, has shown excellent results in antitumor and antibacterial activity . In this context, the present work constitutes the first clinical protocol of local application of nanoemulsion chloro-aluminum phthalocyanine (AlClFc) followed by irradiation in human gingiva, and analyzed descriptively and comparatively , by means of immunohistochemistry , the expression of RANK , RANKL , OPG and VEGF in a split -mouth model. Eight healthy volunteers with clinical indication for extraction were included in the study . Seven days before the extraction, was injected in the gingiva of participants, 5µM of nanoemulsion AlClFc followed by irradiation with diode laser (660nm, 7J/cm2 ), the contralateral side was used as control. Tissue specimens were removed seven days after the TFD is performed. Tissues sample were divided into two groups (test and control groups) for histological and immunohistochemical analysis. Patients were monitored at days, 0, 7, 14 and 30 to assess adverse effects of the therapy. Vascular alterations were seen in gingival samples that received PDT. Areas of edema and vascular congestion, and intense vascularization were viewed . Additionally, dystrophic calcification in subepithelial region were observed in the test group. The results showed a similar pattern of immunostaining scores of RANK, RANKL and VEGF between the test and control groups, with no statistically significant difference (p = 0.317, p = 0.777, p = 0.814, respectively). RANK and RANKL exhibited weak or absent immunostaining in most specimens analyzed. There was no immunostaining for OPG. VEGF showed moderate to strong immunostaining in specimens from the test group. In addition, the clinical study showed that therapy was well tolerated by all patients. Adverse effects were short-time and completely reversible. Taken together, the results presented in this study showed that PDT mediated by nanoemulsion containing AlClPc is safe for clinical application in gingival tissue and suggests that a strong immunostaining for VEGF after therapy. (AU)

Triagem de vários excipientes para compressão direta: uma nova perspectiva com base nas propriedades funcionais / Screening of several excipients for direct compression of tablets: a new perspective based on functional properties

Os excipientes são materiais amplamente utilizados para formular fármacos através de compressão direta. No entanto, as propriedades do pó e compressão desses materiais são afetadas pela presença de lubrificantes e ingredientes ativos. Este estudo utilizou uma metodologia para avaliar a eficácia destes materiais como agentes de compressão direta. O efeito de três lubrificantes (estearato de magnésio, ácido esteárico e talco) na compressibilidade e compactação dos materiais foi avaliado pelo índice de compressibilidade e sensibilidade do lubrificante, respectivamente. Da mesma forma, a capacidade da diluição foi avaliada com um fármaco pouco compressível como o acetaminofeno. Finalmente, a recuperação elástica dos comprimidos foi avaliada aos cinco dias após a produção. Todos os lubrificantes aumentaram a compressibilidade destes materiais e a sua fluidez. No entanto, os lubrificantes hidrofóbicos, tais como o estearato de magnésio tem um efeito negativo sobre a compactação, em especial em materiais plásticos com uma superfície lisa, como o amido 1500. O amido de arroz e de mandioca e ácido algínico apresentaram a maior recuperação elástica (> 5%), indicando uma elevada tendência para a laminação. Além disso, os materiais plásticos com alta deformação, tais como o sorbitol, e polivinilpirrolidona (PVP-K30), exibiram a melhor potencial de diluição (~10%), enquanto que o ácido algínico mostrou um valor muito elevado (~ 70%). Em termos de desempenho, o sorbitol, o PVP-K30, alginato de sódio, Avicel PH-101, e de amido pré-gelatinizado são os materiais mais adequados para a compressão direta de fármacos.

Excipients are widely used to formulate solid drug forms by direct compression. However, the powder-forming and tableting properties of these excipients are affected by the presence of lubricants and active ingredients. In this study, a screening methodology was employed to test the performance of an excipient for direct compression. The effects of three lubricants (magnesium stearate, stearic acid and talc) on the compressibility and compaction of these excipients were assessed by the compressibility index and lubricant sensitivity ratio, respectively. Likewise, the dilution potential in blends with a poorly compactible drug such as acetaminophen was also assessed. Finally, the elastic recovery of tablets was evaluated five days after production. All lubricants increased the compressibility of these excipients and improved their flowability. However, hydrophobic lubricants such as magnesium stearate had a marked negative effect on compactibility, especially in plastic-deforming and more regularly-shaped materials with a smooth surface such as Starch 1500. Alginic acid, rice and cassava starches had the largest elastic recovery (>5%), indicating a tendency to cap. Moreover, highly plastic deforming materials such as sorbitol and polyvinylpyrrolidone (PVP-K30) exhibited the best dilution potential (~10%), whereas alginic acid showed a very high value (~70%). In terms of performance, sorbitol, PVP-K30, Avicel PH-101, sodium alginate and pregelatinized starch were the most appropriate excipients for the direct compression of drugs.

Variantes no gene MBL2 codificador da Lectina Ligante de Manose (MBL): implicações na leishmaniose visceral humana / Genetic variants of MBL2 encoding Mannose-binding lectin (MBL): implications in human visceral leishmaniasis

A leishmaniose visceral (LV) ou calazar é uma doença endêmica, crônica, grave e de alta letalidade se não tratada. Os estudos apontam a proteína Lectina Ligante de Manose (MBL), codificada pelo gene MBL2, como uma peça-chave na imunidade inata, dada a sua função no reconhecimento microbiano, na eliminação, inflamação e morte celular. Neste trabalho realizamos um estudo do tipo caso-controle que teve como objetivo investigar a associação entre variantes no gene MBL2 e a suscetibilidade à LV em indivíduos residentes em áreas endêmicas da Ilha de São Luís-MA. A amostra foi constituída por 322 indivíduos, sendo 161 casos com LV, não aparentados, de ambos os sexos, residentes em áreas endêmicas da doença na Ilha de São Luís e 161 controles saudáveis, não infectados e não aparentados da mesma região. A identificação dos casos de LV se deu por meio do contato constante com os principais hospitais e ambulatórios de referência para a doença na cidade. Também foram feitas buscas de pacientes com LV em ambiente domiciliar, a partir de registros da FUNASA-MA. A análise molecular consistiu na genotipagem de 6 variantes localizadas na região promotora [posições -550 (C>G), -221(G>C), +4(C>T)] e codificadora [códons 52 (C>T), 54 (G>A) e 57 (G>A)] do gene MBL2, através da reação em cadeia da polimerase e sequenciamento automático. A dosagem da proteína MBL no soro foi realizada pelo teste de ELISA. Verificamos que os fenótipos MBL dependem do conjunto de alelos presentes no gene MBL2, sendo nítido o efeito que as variantes defectivas causam nos níveis da proteína. Não encontramos diferença significativa entre casos e controles em relação à distribuição dos genótipos MBL2 e dos níveis séricos de MBL. As frequências alélicas das variantes exônicas na amostra total mostram que o alelo A é o mais comum (74,8%) e que os alelos defectivos (B, C e D) se encontram principalmente em heterozigose (36,6%), o que reforça a ideia de que alelos MBL2 defectivos são mantidos na população ...

Visceral leishmaniasis (VL), also known as kalazar, is an endemic, chronic, severe and highly lethal disease when not treated. Studies have shown that the protein Mannose-biding lectin (MBL), encoded by the gene MBL2, is the major player in innate immune system due its role in microbial recognition, elimination and inflammation as well as in the cell death. In the current work, we conducted a case-control study which aimed to investigate the association between variants in the gene MBL2 and the susceptibility to VL in individuals living in endemic areas of the São Luís - MA. 322 individuals participated in this study. Of these, 161 were VL cases being unrelated individuals of both sexes, and inhabitants from endemic areas of the disease in São Luís. The other 161 individuals were uninfected healthy controls, being unrelated and from the same region. The identification of VL cases occurred by visiting reference hospitals and clinics in the city. VL patients were identified in the household environment through the records of FUNASA-MA. Molecular analysis consisted in genotyping six variants located in the promoter region [positions -550 (C> G), -221 (G> C), +4 (C> T)] and coding region [codons 52 (C> T), 54 (G> A) and 57 (G> A)] of the MBL2 gene by polymerase chain reaction and automated DNA sequencing. The concentrations of MBL protein in the serum was performed by ELISA. We found that MBL phenotypes depend on the number of alleles present in the gene MBL2, being clear the consequence of the defective variants in the protein levels. There was no significant difference between cases and controls regarding the distribution of MBL2 genotypes and MBL serum levels. The allele frequencies of exon variants in the overall sample showed that the A allele is the most common (74.8%) and that the defective alleles (B, C and D) are mainly heterozygous (36.6%). This highlights the idea that defective MBL2 alleles are maintained in the population to confer selective ...

Treatment of toxic epidermal necrolysis with intravenous immunoglobulin: a series of three cases / Tratamento da necrólise epidérmica tóxica com imunoglobulina endovenosa: uma série de três casos

Stevens-Johnson's syndrome (SJS) and toxic epidermal necrolysis (TEN) are life-threatening dermatoses, that lead to keratinocyte apoptosis induced by interactions between Fas (cell death receptor) and soluble Fas-ligand, present in serum of Stevens-Johnson's syndrome / toxic epidermal necrolysis patients. Anti-Fas antibodies in intravenous immunoglobulin (IVIG) would block the apoptosis cascade. Three cases of toxic epidermal necrolysis occurred in one male and two female patients, after use of allopurinol, leprosy multidrug therapy concomitant with dipyrone, and diclofenac. The cases were treated with intravenous immunoglobulin 2-3 mg/kg and prednisone 20-50 mg/day. The interruption of new lesions outbreak and reepithelization were extremely fast after the use of intravenous immunoglobulin, without adverse effects. Controlled studies are needed to confirm the efficacy of intravenous immunoglobulin in Stevens-Johnson's syndrome / toxic epidermal necrolysis, but the results seem promising.

A Síndrome de Stevens-Johnson e a Necrólise Epidérmica Tóxica são dermatoses graves, que levam à apoptose dos queratinócitos induzida pela interação entre Fas (receptor de morte celular) e Fasligante solúvel, presente no soro de pacientes com Síndrome de Stevens-Johnson e Necrólise Epidérmica Tóxica. Anticorpos anti-Fas contidos na imunoglobulina endovenosa podem bloquear esta cascata apoptótica. Três casos de Necrólise Epidérmica Tóxica são descritos, ocorrendo após uso de alopurinol, diclofenaco e poliquimioterapia para hanseníase concomitante com dipirona. Os três casos foram tratados com imunoglobulina endovenosa 2-3 mg/kg, divididos em 4 ou 5 dias e prednisona 20-50 mg/dia. A interrupção no surgimento de novas lesões e a repitelização foram extremamente rápidas, sem ocorrência de efeitos adversos. Estudos controlados são necessários para confirmar a eficácia da imunoglobulina endovenosa na Síndrome de Stevens-Johnson e Necrólise Epidérmica Tóxica, porém, seus resultados parecem ser promissores.

Quantification of Fas protein in CSF of patients with neurocysticercosis / Quantificação da proteína Fas no LCR de pacientes com neurocisticercose

Neurocysticercosis is a parasitic disease that affects the central nervous system. The objective of this study was to investigate the correlation between neuronal death evaluated by the quantification of Fas apoptotic factor and the different evolutive forms of neurocysticercosis accompanied or not by epileptic seizures. METHODS: Cerebrospinal fluid samples from 36 patients with a diagnosis of neurocysticercosis divided into the following groups: active cystic form (n=15), 9 patients with and 6 without seizures, and calcified form (=21), 9 with and 12 without seizures. Fourteen patients comprised the control group. Fas protein concentrations were determined by ELISA. RESULTS: Only the group of patients with calcified cysts without seizures presented cerebrospinal fluid levels of Fas similar to those of the control group. Higher levels were observed for the other groups. CONCLUSIONS: The present finding suggests high cerebrospinal fluid levels of soluble Fas protein, except for patients with calcified cysts without seizures. Significant differences were observed for the group with calcified cysts and seizures, suggesting greater neuronal damage in these patients. Replacement of the term inactive cyst with reactive inactive cyst is suggested.

Neurocisticercose é uma doença parasitária que afeta o sistema nervoso central. O objetivo deste estudo foi investigar a correlação entre morte neuronal por meio da quantificação do fator apoptótico Fas e a presença de neurocisticercose nas suas diferentes fases evolutivas, acompanhadas ou não de crises epilépticas. MÉTODOS: Foram analisadas amostras de líquido cefalorraquidiano em 36 pacientes com diagnóstico de neurocisticercose, determinando-se as concentrações da proteína Fas pelo método ELISA. Foram considerados os seguintes grupos: forma cística ativa n=15 (9 com crises, 6 sem crises), forma calcificada n=21 (9 com crises, 12 sem crises) e 14 pacientes (grupo controle). RESULTADOS: Apenas o grupo com calcificações sem crises apresentou níveis de Fas semelhantes ao controle. Maiores níveis foram observados nos outros grupos. CONCLUSÕES: As formas ativa e calcificada apresentam níveis elevados da proteína Fas, exceto para as formas calcificadas sem crises. No grupo de calcificações com crise, observamos diferenças mais expressivas, sugerindo maior dano neuronal. Sugerimos a substituição da denominação "cisto inativo" por "cisto inativo reagente".

The role of Fas ligand protein in the oxidative stress induced by azoxymethane on crypt colon of rats / O papel da proteína ligante Fas no estresse oxidativo induzido pelo azoximetano em criptas do colo de ratos

PURPOSE: To study the protein Fas ligand (FasL) on the expression of apoptosis, using a model of oxidative stress induced by azoxymethane (AOM), in the crypt of colon in rats. METHODS: Wistar rats (n=14) were assigned into two groups: control (n=7) and AOM (n=7). A single subcutaneous administration of AOM (5mg/kg) or saline solution was performed at the beginning of third week and after three hours samples of proximal colon were collected. The expression of FasL was quantified (Software ImageLab) in percentage of areas in the top, base and all crypt. Results were expressed as mean ± sd (Shapiro-Wilks test and t Student test) (p < 0.05). RESULTS: In the animals of CG there was no significant difference between the FasL expression of the top (10.75±3.33) and basal (11.14±3.53) colon crypt (p=0.34293740). In the animals of AOM there was no significant difference between the FasL expression of the top (8.86±4.19) and basal (8.99±4.08) colon crypt (p=0.78486003). In the animals of CG (10.95±3.43) and AOM (8.92±4.13) there was a significant difference of the FasL expression (p=0.026466821). A significantly decrease on the FasL expression was observed in the animals of CG (10.75±3.33) and AOM (8.86±4.19) in the top crypt (p=0.00003755*). A significant decrease was also observed in the animals of CG (11.14±3.53) and AOM (8.99±4.08) in the basal colon crypt (p=0.00000381**). CONCLUSION: Azoxymethane induce the oxidative stress and the significantly decrease of FasL expression, although there is no significant difference between basal and top of colon crypt linked to consumption-activation of Fas ligand.

OBJETIVO: Avaliar o marcador de apoptose Fas ligante (FasL) em um modelo de estresse oxidativo induzido pelo azoximetano (AOM) na cripta de cólon em ratos. MÉTODOS: 14 ratos Wistar foram distribuídos em dois grupos: controle (n=7) e AOM (n=7). A AOM (5mg/kg) ou solução salina foi aplicada via subcutânea e a coleta de amostras de colo proximal ocorreu 3 horas após. A FasL foi quantificada pelo percentual de áreas no topo, base e toda a cripta. Os resultados foram submetidos aos testes de Shapiro-Wilks e t de Student (p < 0,05). RESULTADOS: No grupo GC, não houve diferença significativa entre a expressão da FasL no topo (10,75 ± 3,33) e base (11,14 ± 3,53) da cripta (p=0,34293740). No grupo AOM não houve diferença significativa entre a expressão da FasL no topo (8,86 ± 4,19) e base (8,99 ± 4,08) e cripta (p=0,78486003). No grupo GC (10,95 ± 3,43) e AOM (8,92 ± 4,13), houve uma diferença significativa da expressão da FasL (p=0,026466821). Redução significativa na expressão da FasL ocorreu nos em GC (10,75 ± 3,33) e AOM (8,86 ± 4,19) no topo da cripta (p = 0,00003755*). Foi observada diminuição significativa em GC (11,14 ± 3,53) e AOM (8,99 ± 4,08) na base da cripta (p=0,00000381**). CONCLUSÃO: Azoximetano induziu o estresse oxidativo identificado pela diminuição significativa da expressão da FasL, embora não haja diferença significativa entre a base e parte superior da cripta associada à ativação de consumo do FasL.

A quantitative study of the influence of coprocessing of binders on the mechanical properties of paracetamol tablets

A 2³ factorial experimental design has been used to quantitatively study individual and interaction effects of the nature of binder (N), concentration of binder (C) and the applied pressure (P) on two mechanical properties, namely, tensile strength (TS) and brittle fracture index (BFI), of paracetamol tablets. The factorial design was also used to study the quantitative effects of coprocessing of binders on the mechanical properties. The results obtained from this study suggest that the nature (i.e. plastic/elastic) and ratio of binders coprocessed together alter the influence of C and P on TS and BFI.

Utilizou-se planejamento experimental fatorial 2³ para estudar, quantitativamente, os efeitos individuais e de interação da natureza do ligante (N), concentração do ligante (C) e a pressão aplicada (P) em duas propriedades mecânicas, como forças de ruptura (TS) e índice de fragilidade (BFI) de comprimidos de paracetamol. O planejamento fatorial foi, também, empregado para estudar os efeitos quantitativos do coprocessamento de ligantes nas propriedades mecânicas. Os resultados obtidos desse trabalho sugerem que a natureza (plástica/elástica) e a proporção de ligantes coprocessados, juntas, alteram a influência de C e P em TS e em BFI.